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Q Sepharose FF分离藻红蛋白的工艺研究
其他题名Study on Separation of Phycoerythrin by Q-Sepharose Fast Flow
张彬 ; 王翠芹 ; 高敏 ; 张轶 ; 顾铭 ; 王长海
发表期刊安徽农业科学
ISSN0517-6611
2012-09-01
卷号40期号:25页码:12371-12373
关键词离子交换色谱 q Sepharose Ff 藻红蛋白 分离 工艺放大
产权排序中国科学院烟台海岸带研究所;中国科学院研究生院;中国科学院过程工程研究所;南京农业大学;
通讯作者顾铭 guming@home.ipe.ac.cn
作者部门分析测试中心
英文摘要[目的]建立Q Sepharose FF分离藻红蛋白的工艺方法并验证其放大可行性。[方法]通过对洗脱条件、上样体积以及洗脱流速的优化;确定最佳分离工艺条件;在确定的工艺条件下;将上样体积与柱体积等比例放大。[结果]Q Sepharose FF分离藻红蛋白的最佳工艺条件为:将30 ml坛紫菜提取液加载到8 ml Q Sepharose FF柱上;以1 ml/min的流速使用添加0-0.10-0.35-1.00 mol/L NaCl的NaH2PO4-Na2HPO4缓冲溶液(pH 6.0)分步洗脱;收集0.35 mol/L NaCl溶液洗脱时的色谱峰。在此条件下R-藻红蛋白的回收率和纯度系数(A565/A280)分别为44.3和1.15。按照该工艺;将75 ml藻红蛋白提取液加载到20 ml Q Sepharose FF柱上进行分离;发现分离效果没有发生明显变化。[结论]使用Q Sepharose FF介质能够分离坛紫菜提取液中的藻红蛋白且该工艺易于放大。
中文摘要This study aimed to establish an efficient process for separation of phycoerythrin by using Q Sepharose Fast Flow resin and verify its feasibility.[Method] Elution gradient,loading volume and flow rate were optimized to determine the optimal separation condition,under which the scale up process was verified.[Result] The optimal condition for separation of phycoerythrin by using Q Sepharose Fast Flow resin was investigated: 30 ml of laver extract was loaded to a Q Sepharose Fast Flow column with a bed volume of 8 ml;subsequently,the column was eluted under a stepwise gradient elution of 0-0.10-0.35-1.00 mol/L NaCl solution(pH 6.0) at a constant flow rate of 1 ml/min;the elution peak under 0.35 mol/L NaCl solution was collected,and the recovery rate and purity coefficient(A565/A280) of phycoerythrin were determined as 44.3 and 1.15,respectively.Based on the established process,75 ml of phycoerythrin extract was loaded to a Q Sepharose Fast Flow column with bed volume of 20 ml for separation,while no significant variation was observed in separation result.[Conclusion] Phycoerythrin can be well separated from laver extract by Q Sepharose Fast Flow resin and the process is feasible for scale-up.
资助机构国家自然科学基金(51143012);山东省自然科学基金(ZR-2009BM006)
语种中文
文献类型期刊论文
条目标识符http://ir.yic.ac.cn/handle/133337/5904
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GB/T 7714
张彬,王翠芹,高敏,等. Q Sepharose FF分离藻红蛋白的工艺研究[J]. 安徽农业科学,2012,40(25):12371-12373.
APA 张彬,王翠芹,高敏,张轶,顾铭,&王长海.(2012).Q Sepharose FF分离藻红蛋白的工艺研究.安徽农业科学,40(25),12371-12373.
MLA 张彬,et al."Q Sepharose FF分离藻红蛋白的工艺研究".安徽农业科学 40.25(2012):12371-12373.
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