| 猴金属硫蛋白α域（MT-α cDNA）突变体的构建、表达及工程菌对重金属的吸附 |
| 其他题名 | Construction and expression of m etaU0thi0nein mutations and the heavy-m etaladsorption capacity of the engineered bacteria
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| 路延笃
; 黄巧云
; 陈雯莉
; 雷磊
; 何小川
; 蔡鹏
; 梁巍
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| 发表期刊 | 环境科学学报
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| ISSN | 0253-2468
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| 2008
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| 卷号 | 28期号:9页码:1763-1770 |
| 关键词 | 猴金属硫蛋白
重金属
抗性
吸附
串连体
Swiss-model
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| 产权排序 | [1]华中农业大学农业微生物学国家重点实验室;[2]华中农业大学农业部亚热带农业资源与环境重点开放实验室;[3]中国科学院烟台海岸带可持续发展研究所,烟台264003 [4]中国科学院海洋研究所,青岛266071 |
| 通讯作者 | 路延笃
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| 作者部门 | 生物资源实验室
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| 英文摘要 | 采用PCR技术和同尾酶手段,构建了猴金属硫蛋白（mMT）α域的串连体,并构建了表达MTα串连体的工程菌,获得了表达二聚串连体（MTα2）、三聚串连体（MTα3）、五聚串连体（MTα5）的工程菌.结果表明,工程菌在0.1mmol·L^-1IPTG诱导3h后表达量最高.Cd^2＋浓度为0.5mmol·L^-1时,对照菌pGEX-2T/BL21生长受到严重胁迫,工程菌表现出较强的抗性,MTαn/BL21（n=2、3、5）生长几乎不受到胁迫;Cd2＋浓度为1.0mmol·L^-1时,MTα5/BL21表现出较强的耐受能力.Cd2＋浓度为0.5mmol·L^-1时,工程菌对镉的富集能力明显高于对照,其中富集能力最强的是MTα3/BL21（76%）.与对照pGEX-2T/BL21相比,MT/BL21对锌吸附能力显著提高,而转化有MTα串连体基因的工程菌对锌的吸附能力没有提高,说明工程菌对Cd2＋的吸附特异性增强.结构预测显示,MTα、MTα2、MTα3的二级结构中α螺旋依次增加,推测突变蛋白的疏水性增强,三维结构稳定.MTα4、MTα5二级结构中,α螺旋数目减少,尤其是MTα5,其α螺旋几乎完全遭到破坏,疏水性大为降低.对基因工程菌吸附镉的实验表明,MTα3/BL21对镉具有较高的特异性和富集容量. |
| 中文摘要 | Based on PCR and isocaudamer techniques，a series of monkey metallothionein (mMT)mutations were constructed．Engineered bacteria
expressing the MTa (：luster were obtained as MTa／BL21，MTa2／BL21，MT 3／BL21 and MTct 5／BL21． The engineered bacteria expressed the highest
amount 0f target protein when induced with 0．1 mlnol·L-。IPTG for 3 h．Toxicity to control was found and no toxicity of Cd to engineered bacteria was
observed for MTa2／BL21，MT 3／BL21 and MTot5／BL21 in the presence of 0．5 mmol‘L Cd“ ． As Cd“ concentration increased to 1
． 0 m m ol。L ～ ，
MTa5／BL21 showed higher resistance．Among the series of engineered bacteria，MT“3／BL21 removed the greatest percentage of Cd“ (76％ )，followed
hy MT oc，／BL21(72％)when the eoneentration of Cd was 0 5 mmol·L ．The adsorption capacity for Zn by MT／BL21(0．118 mmol·mg dry
weight ceils)was increased dramatically while no significant improvement was observed for the other engineered bacteria．The phenomenon indirectly suggests an increased specificity of the engineered bacteria for Cd“ adsorption． Based on the predicted secondary structure， increased hydrophobic interaction was observed for MTo(，MTct 2 and MTa3． However the content of a —helix was decreased in MTa4 and MT 5，especially in MTct5． |
| 资助机构 | 国家高技术研究发展计划(863)(No．2006AA06Z350)和教育部博士点基金(No．20020504023)
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| 收录类别 | CSCD
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| 语种 | 中文
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| CSCD记录号 | CSCD:3399892
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| 引用统计 |
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| 文献类型 | 期刊论文
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| 条目标识符 | http://ir.yic.ac.cn/handle/133337/4155
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| 专题 | 海岸带生物学与生物资源利用重点实验室_海岸带生物学与生物资源保护实验室
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推荐引用方式
GB/T 7714 |
路延笃,黄巧云,陈雯莉,等. 猴金属硫蛋白α域（MT-α cDNA）突变体的构建、表达及工程菌对重金属的吸附[J]. 环境科学学报,2008,28(9):1763-1770.
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| APA |
路延笃.,黄巧云.,陈雯莉.,雷磊.,何小川.,...&梁巍.(2008).猴金属硫蛋白α域（MT-α cDNA）突变体的构建、表达及工程菌对重金属的吸附.环境科学学报,28(9),1763-1770.
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| MLA |
路延笃,et al."猴金属硫蛋白α域（MT-α cDNA）突变体的构建、表达及工程菌对重金属的吸附".环境科学学报 28.9(2008):1763-1770.
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