| 三角褐指藻基因枪转化体系的建立 |
其他题名 | Establishment of a Micro-particle Bombardment Transformation System for Phaeodactylum tricornutum
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| 路延笃
; 崔红利
; 秦松
; 冯大伟
; 姜鹏
; 衣悦涛
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发表期刊 | 中国生物工程杂志
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ISSN | 1671-8135
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| 2008-12-31
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卷号 | 29期号:06 页码:91-96 |
关键词 | 三角褐指藻
基因枪转化
Gus
抗生素敏感性
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产权排序 | 中国科学院烟台海岸带研究所;中国科学院海洋研究所;中国科学院研究生院 |
通讯作者 | 路延笃
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作者部门 | 生物资源实验室
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英文摘要 | 三角褐指藻具有较高的脂肪酸含量,是一种很有潜力的生物柴油生产原料.此外,它是多不饱和脂肪酸尤其是二十碳五烯酸(EPA)重要的来源.合适转化体系的缺乏限制了通过基因工程手段对其进行改造.首次采用基因枪方法成功地将外源基因转入三角褐指藻,转化细胞经染色后呈现蓝色,表明外源报告基因β-糖苷酸酶( GUS ) 基因得到了成功的表达.同时还进行了转化参数等因素对转化效率影响的分析,优化了转化条件.结果显示最佳的转化条件为: 每60 μg钨粉包被1 μg质粒DNA,样品室真空度为27英寸汞柱,可裂膜为1500psi,受体与阻挡网距离6 cm.此外,转化载体采用了三角褐指藻内源基因fcp的启动子,实现了外源基因在细胞内的表达.通过5种基因工程中常用抗生素对三角褐指藻生长抑制的研究发现,三角褐指藻对卡那霉素、氨苄青霉素、链霉素和新霉素不敏感,500 mg/L 的卡那霉素、氨苄青霉素和新霉素,以及1000 mg/L 链霉素仍不能抑制其生长;三角褐指藻对氯霉素非常敏感,130 mg/L的氯霉素可以完全抑制其生长,其半抑制浓度为60 mg/L.这为基因工程手段改造三角褐指藻脂肪酸代谢相关途径奠定了基础. |
中文摘要 | Phaeodactylum tricornutum is a potential source of biodiesel for its abundance in fatty acids.Moreover as its fatty acid composition contains much eicosapentaenoic acid(EPA,20:5D5,8,11,14,17),P.tricornutum represents an interesting alternative source for the industrial production.The absence of an adapted transformation system has been a serious limitation for its genetic manipulation.A novel transformation method was firstly established using micro-particle bombardment in P.tricornutum.The results showed t... |
资助机构 | 国家“863”计划(2006AA100311;20060110A4013); 中国科学院知识创新工程重要方向项目(KZCX2-YW-209,KSCX2-YW-G-002,KZCX2-YW-225)资助项目
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收录类别 | CSCD
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语种 | 中文
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CSCD记录号 | CSCD:3620455
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引用统计 |
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文献类型 | 期刊论文
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条目标识符 | http://ir.yic.ac.cn/handle/133337/4127
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专题 | 海岸带生物学与生物资源利用重点实验室_海岸带生物学与生物资源保护实验室
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推荐引用方式 GB/T 7714 |
路延笃,崔红利,秦松,等. 三角褐指藻基因枪转化体系的建立[J]. 中国生物工程杂志 ,2008,29(06 ):91-96.
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APA |
路延笃,崔红利,秦松,冯大伟,姜鹏,&衣悦涛.(2008).三角褐指藻基因枪转化体系的建立.中国生物工程杂志 ,29(06 ),91-96.
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MLA |
路延笃,et al."三角褐指藻基因枪转化体系的建立".中国生物工程杂志 29.06 (2008):91-96.
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